《港區國安法》正式實施後，逾萬名反對立法的示威者7月1日參與「七一」遊行，眾人在銅鑼灣聚集叫喊「港獨」口號，防暴警員施放胡椒球彈、催淚彈和出動水砲車驅散人群，並採取拘捕行動。其間，有示威者接連襲警，導致7名警員受傷，警方其後共拘捕約370人，並首度引用《港區國安法》扣查當中10名涉嫌藏有或展示「港獨」旗幟標語的人士，其中9人或面臨至少三年的牢獄之災。
民陣「七一」遊行遭警方發出反對通知書，但不少反對《港區國安法》、堅持「五大訴求」的示威者揚言繼續「上街」。消息稱，警方基於近期參與示威的是一些較暴力人士，於是派出大批防暴警察，從7月1日清晨開始，在銅鑼灣一帶戒備及巡邏。示威者則於當天中午12時後在崇光百貨附近聚集，部分人大喊「香港獨立」口號，警員首次舉起紫色旗幟警告後，呼籲泛民街站人員撤走，隨即施放胡椒噴劑，並帶走立法會議員尹兆堅和陳志全等人。
港府發言人嚴正譴責
警方為阻遏示威者聚集，不斷截查可疑人。有警員7月1日中午1時許在百德新街截查一名男子，搜獲寫有「香港獨立」的旗幟，雖然這四個大字前面寫了字體極細小的「不要」兩字，但警員以其涉嫌宣示「港獨」意圖明顯作出拘捕，令他成為《港區國安法》生效後首名被捕者。
還有多名示威者因涉違反《港區國安法》被捕，包括在東角道展示「香港獨立」標語的婦女；在利園山道揮動港獨旗的15歲少女；以及在羅素街近堅拿道東遭警員截查、藏有「港獨」標語的兩名36歲女子，和在高士威道被警員搜出藏有「港獨」旗幟的26歲男子。
對於有人藏有和揮舞「港獨」旗幟及印刷品、呼叫「香港獨立」口號，港府發言人7月1日晚間嚴正譴責，指他們涉嫌煽動或教唆他人分裂國家，涉違《港區國安法》，「公然挑戰中央政府和特區政府的底線」。
有店舖遭示威者打砸
上萬名不理會警方勸告的示威者，當天中午約3時在民陣副召集人陳皓桓等人帶領下，佔據軒尼詩道馬路遊行，防暴警在水砲車射水協助下進行驅散，但部分人逃離期間破壞波斯富街西餅店和英皇道咖啡店。港島市面約於當晚10時回復平靜。警方表示，截至7月1日晚10時共拘捕約370人，當中10人（6男4女）涉嫌違反《港區國安法》，其餘被捕人士分別涉嫌非法集結、瘋狂駕駛和持有攻擊性武器罪等。
